[1]莫嵩杰,谢祥官,黄振飞,韦丽珍,覃水云,黄海月,伍冠一,张煜,温海成.壮医桉楝双莲方治疗小鼠ACD慢性瘙痒的止痒作用研究[J].亚太传统医药,,16(11):41-45.
鼠：雄性ICR小白鼠
小鼠ACD模型建立：参照文献[6]的方法建立小鼠ACD模型。48只ICR小鼠适应性饲养1周后，随机分为6组，分别为空白对照组、造模组（0.2%DNFB）、壮医桉楝双莲方低剂量组、壮医桉楝双莲方中剂量组（20mg/kg）、壮医桉楝双莲方高剂量组（50mg/kg）、阳性对照组（地塞米松，5mg/mL），每组各8只。除空白对照组外，其他组实验前5天剃除颈背部毛发（面积约为3cm×3cm），剃除小鼠腹部毛发（面积约为4cm×4cm），使皮肤完全暴露出来。提前3天对小鼠腹部皮肤给予0.5%DNFB（丙酮∶橄榄油4∶1稀释），给药量为μL/只。第0天对小鼠颈部剃毛部位给予0.2%DNFB（丙酮∶橄榄油按4∶1稀释），给药量为μL/只，之后每周用0.2%DNFB进行3次颈部皮肤的敏化（具体敏化时间见图1）给药量为μL/只。空白组不予用药，造模组仅致敏给药，给药量为μL/只，每周3次进行皮肤敏化；其余4组在需要进行敏化的当天，上午7点进行相应的药物治疗，下午5点进行0.2%DNFB皮肤敏化，除开致敏的天数，其余每天均按时进行相应的药物治疗给药，直至实验结束，实验共进行25天。
[2]尹翠,毕凌波,张奉明,顾佳慧,李燕强.内皮素A型受体在内皮素1诱发小鼠急性瘙痒中的作用[J].江苏医药,,46(08):-.
鼠：SNScre转基因小鼠；Advillincre/ETARf/f和SNScre/ETARf/f小鼠分别由Advillincre和SNScre小鼠与ETARf/f小鼠交配产生,并繁殖5代后用于实验。
转基因小鼠鉴定
颈部瘙痒模型
参考Wang等[9]和Patel等[10]建立颈部瘙痒模型。至少提前1周剃光小鼠颈背部的毛发,并且按照实验操作的标准流程提前让小鼠适应实验环境和实验过程。实验前至少2d,将小鼠单独放在高架金属网上的塑料盒(10cm×10cm×15cm)中至少适应20min。实验时用26G注射器在小鼠颈背部皮内注射ET-1(50ng溶于50μL生理盐水),然后立即将小鼠放回盒中,用摄像机录制45min。最后在双盲条件下,计算视频中实验鼠发生痒行为(即抓挠)的次数。
[3]姜洋,刘岳鹏,何学明,谈笑.mTOR-S6K1-Gli1信号通路在小鼠慢性瘙痒中的作用[J].郑州大学学报(医学版),,55(04):-.
鼠：雄性2月龄昆明小鼠
动物分组
将40只小鼠分为5组:空白对照组、溶剂对照组、致痒组、致痒+抑制剂组和致痒+抑制剂溶剂组,每组8只。动物模型的制备参照文献[10,11]介绍方法,将给药位置调整为小鼠腰背部。实验前2d,小鼠腰背部备皮,以双侧髂嵴连线中点为中心,直径2cm。实验当天记为第0天,上午10点致痒组、致痒+抑制剂组及致痒+抑制剂溶剂组小鼠在备皮中心位置一次性涂抹16g/L恶唑酮溶液(乙醇为溶剂)15μL致敏,空白对照组、溶剂对照组分别涂抹15μL生理盐水和乙醇;第7、9、12、14、16、19天上午10点,致痒组小鼠涂抹15μL8g/L恶唑酮溶液进行激发,空白对照组、溶剂对照组小鼠分别给予15μL的生理盐水、乙醇涂抹,致痒+抑制剂组、致痒+抑制剂溶剂组小鼠同致痒组激发外,致痒+抑制剂组在第14、15、16天上午9点给予5μL40g/L的GANT61溶液(以体积比为4∶1的玉米油和乙醇为溶剂)鞘内注射,致痒+抑制剂溶剂组则给予等体积抑制剂溶剂。
[4]王华,李雅,汪雯,梅之南,熊海容.麝香草酚对SADBE诱导慢性瘙痒模型小鼠的治疗作用[J].时珍国医国药,,31(04):-.
鼠：C57BL/6小鼠,
SADBE诱导小鼠慢性瘙痒模型建立
参照文献的方法建立SADBE诱导小鼠慢性瘙痒模型[4]。42只小鼠适应性饲养1周后,随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、地塞米松组及麝香草酚低、中、高剂量组,每组7只。实验前2天剃光小鼠颈背部毛发,面积约为2cm×3cm。除空白组外,其他组将20μL0.5%SADBE的丙酮局部应用于小鼠已剃毛腹部皮肤,连续三天每天一次进行敏化。5天后,连续三天每天一次将20μL0.5%SADBE的丙酮局部应用于小鼠已剃毛颈部皮肤。1天后,麝香草酚低、中、高剂量组通过皮下注射方式每天一次应用于小鼠背部皮肤,连续用药3天。对照组小鼠皮下注射生理盐水,时间和频率与给药组相同。在第15天,采用录像机观察并记录小鼠的瘙痒行为学变化。
[5]汤洋,李楠琦,彭哲,黄思婷,万丽.脊髓小胶质细胞激活参与吗啡诱导瘙痒的机制[J].中国疼痛医学杂志,,26(06):-.
鼠：雄性C57BL/6J小鼠
鞘内注射及给药
根据既往实验方法，用微量注射器在小鼠L4-5腰椎间隙行鞘内注射，单次注射小鼠出现甩尾表现则为成功穿刺标志。对照组鞘内注射10μl生理盐水；吗啡组注射0.6nmol吗啡；吗啡加米诺环素组鞘内先注射0.6nmol吗啡并依次分别加0.5nmol、1nmol、2nmol米诺环素鞘内注射。吗啡加p38抑制剂组鞘内先注射0.6nmol吗啡并依次分别加1nmol、2nmol、5nmolp38抑制剂鞘内注射。注射容量均为10μl。
[6]金锦花,李科岩,王玉慧,薛富善.瘙痒介质在AEW诱发的小鼠干皮症模型中的表达[J].昆明医科大学学报,,41(06):5-10.
鼠：SPF级C57BL/6雌性小鼠
小鼠AEW模型的建立
试验前1周剃除小鼠颈背部毛发（范围上自两耳连线，下至第二胸椎节段，面积约2cm×2cm），直至皮肤完全显露。每天固定于上午9时和下午5时涂抹AE和水溶液，制备小鼠干皮症模型。具体方法参照文献[7]，模型组：用浸泡AE溶液（丙酮和乙醚等体积混合）的棉片在剃毛处涂抹15s，再用浸泡蒸馏水的棉片于同一部位涂抹30s，连续7d。对照组小鼠皮肤涂抹蒸馏水，时间频率与模型组相同，第7天处死小鼠。
[7]金锦花,李科岩,王玉慧,薛富善.皮肤干燥症瘙痒小鼠模型的建立[J].中华实用诊断与治疗杂志,,34(03):-.
鼠：SPF级C57BL/6雄性小鼠
模型制备
剃除小鼠颈背部毛发(上自两耳连线,下至第二胸椎节段,面积约2cm×2cm)直至皮肤完全显露。AEW组:参照文献[10]方法制备皮肤干燥症瘙痒小鼠模型。丙酮和乙醚等体积混合,浸泡棉片,于上午9时和下午5时,在小鼠颈背部剃毛处涂抹15s,然后用浸泡蒸馏水的棉片于同一部位涂抹30s,连续7d。对照组:小鼠颈背部剃毛处皮肤涂抹蒸馏水,涂抹方法同AEW组。
[8]崔雪萍,李贵轲,赵键铤,金凡茂,刘衡,王彬.美廉净凝胶的抗炎、抗瘙痒作用研究[J].大理大学学报,,5(02):38-42.
鼠：雌性昆明小鼠
模型：选取50只雌性昆明小鼠，按体质量随机分为空白凝胶组，复方地塞米松凝胶组（7.5mg/kg），美廉净凝胶高、中、低剂量组，每组10只。。在小鼠右耳的正反面涂抹药物，空白凝胶组、受试药各剂量组，按0.02mL/20g体质量给药，复方地塞米松凝胶组按0.04mL/20g体质量给药，每30min涂抹1次，重复操作3次，连续给药3d。最后一次给药后，间隔10min，在各组小鼠的右耳正反面按50μL/只均匀涂抹二甲苯，小鼠左耳不做处理，作为对照，间隔1h，将各组小鼠处死后，使用直径为6mm的打孔器分别取下左右耳相对应处的耳片，称量其重量，计算肿胀度及各给药组小鼠的耳廓肿胀抑制率[8]。
[9]衡冰冰,戴舒阳,杨丹峰,BeekooDeepti,连庆泉,上官王宁.丙泊酚对吗啡鞘内注射所致瘙痒大鼠脊髓内胃泌素释放肽受体的影响[J].中国临床药理学与治疗学,,24(07):-.
鼠：雄性SD大鼠
每只大鼠仅用于一次实验。
鞘内置管和颈内静脉置管
腹腔注射5%水合氯醛(mg/kg),将SD大鼠麻醉后,取俯卧位。手术切口部位为L3-4间隙,即大鼠两侧髂棘连线(L6棘突)向上三个间隙。在手术部位剪毛备皮、消毒、铺巾后做约1.5cm的纵向切口,切开皮肤、皮下筋膜。钝性分离L3-4棘突两侧的肌肉,暴露L3-4棘突间隙,部分剪去L3棘突,用止血钳夹住L4棘突,用打磨过的钝性针头穿破黄韧带、硬脊膜和蛛网膜,以大鼠尾巴突然出现摆动为成功标志,同时有清亮的脑脊液流出。经突破口用长23cm的PE-10导管轻柔地将其头端置入2.5cm,此时可见导管内充盈着清亮的脑脊液。置管成功后,将导管固定缝合于脊柱两侧的肌肉,并于皮下筋膜处再次缝合固定,后经皮下隧道将导管于颈部引出,并再次固定导管。为防止导管打结阻塞,用10μL生理盐水冲洗导管,并将导管顶端用火封闭。
用胶布使大鼠固定于仰卧位,将右侧颈部剪毛备皮,消毒,铺巾后做约1cm的切口,切开皮肤、皮下筋膜、肌层,暴露右侧颈内静脉。待将颈内静脉分离后,先用丝线结扎固定静脉的远心端,再用丝线在静脉的近心端上打结备用,在静脉上剪一个V型切口,将长15cm的PE-50导管(OD:0.96mm,ID:0.58mm,宁波市科技园区安来软件科技有限公司)尖端轻柔地将其向近心端置入1.5cm。回抽有血后注入稀释的肝素,用火封闭导管末端。将导管固定于静脉两侧的肌肉上,经皮下隧道固定在大鼠的颈部。
[10]謝波,王永芳,宋莎莎,吳建兵,李新宇.和厚朴酚對大鼠脊髓背根神經元細胞瞬時受體電位通道活化和小鼠模型瘙癢的影響[J].中華皮膚科雜誌,(07):-.
鼠：清洁级雄性ICR小鼠
组胺诱导的小鼠瘙痒模型实验：
45只ICR小鼠随机分成7组，包括正常对照组3只，模型组、氯苯那敏组、3种剂量和厚朴酚组（50.0、25.0、12.5mg/kg，用5g/L羧甲基纤维素钠配制）和溶媒组每组7只。小鼠颈背部剃毛（2cm×2cm）后，和厚朴酚组用不同浓度和厚朴酚灌胃，正常对照组和模型组给予等量生理氯化钠溶液灌胃，溶媒组给予5g/L羧甲基纤维素钠溶液灌胃，氯苯那敏组给予氯苯那敏5.0mg/kg（用无菌生理氯化钠溶液配制）灌胃。24h后，正常对照组在颈部剃毛区皮内注射μl生理氯化钠溶液，其余各组注射μl（20mmol/L）组胺。随后将每只小鼠单独置于观察笼中，人工计数30min内小鼠后爪搔抓注射部位的次数［9］。
乙醚/丙酮/水（AEW）诱导的小鼠瘙痒模型
实验：28只ICR小鼠随机分成6组，其中正常对照组3只，模型组、3个剂量和厚朴酚组（50.0、25.0、12.5mg/kg，用5g/L羧甲基纤维素钠配制）和溶媒组每组5只。所有小鼠颈背部剃毛；模型组、和厚朴酚组和溶媒组用乙醚∶丙酮（1∶1）擦拭剃毛区15s后，用蒸馏水擦拭30s，正常对照组用生理氯化钠溶液擦拭，每天处理2次，第5天仅上午处理1次，并在第4天时灌胃给药，和厚朴酚组用不同浓度和厚朴酚灌胃，正常对照组给等量无菌生理氯化钠溶液灌胃，溶媒组给予5g/L羧甲基纤维素钠溶液灌
胃。24h后将每只小鼠单独置于观察笼中，观察并人工计数小鼠后爪30min内搔抓造模区的次数［10］。
[11]余应嘉,叶淑芳,陈庆状,王叶茗,欧阳勇.妇洁康洗剂对小鼠抗炎止痒及体外抑菌的作用[J].医院,,19(06):-+.
鼠：SPF级昆明种(KM)小鼠
右旋糖酐致小鼠皮肤瘙痒抑制实验
动物分组如“1.2.1”。各组小鼠背部脱毛2×2cm,于脱毛区域分别滴涂相应药物0×5mL,1日2次,连续7d,于末次给药后30min,予各组小鼠尾静脉注射0.%右旋糖酐1.25mg/kg,以小鼠前爪抓头部搔痒,后爪抓躯干搔痒,嘴咬自己身体各部位作为瘙痒指征,观察记录30min内小鼠搔痒次数及瘙痒持续时间,比较组间差异。
[12]银量,刘哈晓雨,刘雨桐,刘思思,梅之南,廖矛川.青鹏软膏对干皮症瘙痒模型小鼠的治疗作用及分子机制研究[J].时珍国医国药,,30(06):-.
鼠：C57BL/6小鼠
小鼠AEW模型的建立
参照文献[2]的方法建立小鼠的AEW模型。48只C57小鼠适应性饲养1周后,随机分为模型组、空白对照组、苯海拉明组和青鹏软膏大、中、小剂量组,每组各8只。除空白对照组外,其它组实验前1天剃除颈背部毛发,使皮肤完全暴露出来,面积约为2cm×3cm。每天固定在上午9点和下午5点用浸泡AW溶液(丙酮和二乙醚等体积混合液)的棉球敷在小鼠剃毛部位的颈背部皮肤15s,再用浸泡了双蒸水(water)的棉球敷在小鼠颈背部皮肤同一部位30s,每天两次。处理之后90min,小、中、大剂量组分别颈部涂清鹏软膏0.,1.25,2.5g·kg-1,苯海拉明腹腔注射苯海拉明10mg·kg-1,连续处理7天。对照组小鼠采用双蒸水涂抹小鼠皮肤,时间频率和实验组相同,第7天处死小鼠。
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